Анеуплоиден скрининг

Най- Анеуплоиден скрининг се използва за определяне на числени хромозомни аберации в in vitro генерирани ембриони, които са предназначени за имплантация. Това е цитогенетично изследване, при което могат да се определят само числени аберации на определени хромозоми. Следователно скринингът за анеуплоидия е форма на предимплантационна диагноза (PGD).

Какво е скрининг на анеуплоидия?

Терминът анеуплоиден скрининг се използва за обобщаване на методите за цитогенетично изследване, които могат да дадат индикация за числени аберации в определени хромозоми при ин витро оплождане (IVF). По принцип скринингът за анеуплоидия може да даде индикации за нулозомия, монозомия и полисомия като Б. дайте тризомия.

При нулозомия хромозомна двойка напълно липсва, в монозомията липсва една хомоложна хромозома на двойка хромозоми, а в полизомията има повече от две хомоложни хромозоми за определена хромозомна двойка. Най-известната полисомия е тризомия 21, която води до синдром на Даун. Тъй като повечето числени хромозомни аберации - особено монозомиите - са смъртоносни, т.е. водят до естествени терминации, спонтанни аборти или мъртвородени деца, само ембриони без разпознаваеми хромозомни аберации се имплантират в матката.

Това трябва да подобри степента на успеваемост на IVF, но определени хромозомни аберации не са непременно смъртоносни, а водят до аномалии и тежки ограничения в по-късен живот, като например при синдрома на Даун или Търнър. Ето защо някои страни имат обща забрана или строги ограничения за този тип предимплантационна диагноза (PGD) по етични причини.

Функция, ефект и цели

Скринингът за анеуплоидия се използва само за ин витро оплождане. Най-важната цел е само прехвърляне на ембриони без разпознаваеми хромозомни аберации в матката, за да се получи възможно най-големият шанс за успех при бременност с изкуствено осеменяване. По принцип може да се направи разлика между двата метода за диагностика на полярното тяло и изследването на ембриона преди имплантацията. Първият метод включва изследване на полярните тела на яйцеклетката, която все още не е оплодена.

Тук се проверява само възможна анеуплоидия на яйцеклетката. Това става при предположението, че около 90% от анеуплоидиите са от майчин произход. Това не е PGD в по-тесния смисъл, а диагноза за предпочитане, тъй като не се е извършило оплождане, т.е. не е било сливане на яйцеклетката със сперматозоид. Скринингът на анеуплоидия върху ембриона преди имплантацията в ранния стадий на бластулата, от друга страна, се квалифицира като PGD, тъй като изследването се отнася до "истинския" ембрионален стадий - дори ако е много ранен стадий, само на няколко дни.

При полярна диагностика на тялото двете полярни тела, които яйцеклетката образува по време на първата и втората мейоза, преди да се слее със сперматозоида, се отстраняват и изследват за анеуплоидия. Така нареченият FISH тест (флуоресценция in situ хибридизация) се използва за определяне на всяка налична анеуплоидия. Досега FISH тестът позволява само изследване на хромозоми 13, 16, 18, 21, 22 и половите хромозоми X и Y. Хромозомите на структурата на двойната спирала се разделят след мейозата се свързват със съответната комплементарна ДНК последователност с помощта на специфични за хромозома ДНК сонди.

ДНК сондите са маркирани с различни флуоресцентни цветове. Хомоложните хромозоми могат да бъдат преброени под светлинния микроскоп в полуавтоматизиран процес, така че да могат да бъдат идентифицирани числени аберации. Аналогично на полярната диагностика на тялото, анеуплоидният скрининг се провежда върху ембриони преди имплантация, които все още са в ранен стадий на бластомер. Сега обаче имаме работа с диплоидни набори хромозоми, чиято двойна спирала първо трябва да бъде разделена, за да се инициира връзката на хромозомите с допълнителните ДНК сонди.

Целта на анеуплоидния скрининг и при двата метода остава положителна селекция на оплодената яйцеклетка in vitro, преди да бъде прехвърлена в матката, за да се постигне възможно най-висок успех за желаната бременност. Много обсъждан етичен проблем възниква от отрицателния подбор, който автоматично е свързан с положителния подбор и който някои крайни критици обичат да използват аргументи, за да го приближат до евтаназия. Друг етичен проблем се наблюдава с използването на IVF за генериране на така нареченото спасително бебе. Положителна селекция от ембриони, генерирани in vitro, може да се използва за култивиране на всемогъщи имуносъвместими стволови клетки, които биха могли да спасят живота на братя и сестри с определени заболявания чрез имплантация.

Рискове, странични ефекти и опасности

Самият скрининг на анеуплоидията, както и извличането на клетъчните ядра, които ще бъдат изследвани, се извършват извън тялото и следователно не са свързани с преки рискове или опасности за здравето и следователно са без странични ефекти. Действителните рискове и опасности се състоят във факта, че все още не е постигната ползата от скрининг на аноиплоиди върху бластомери, т.е. върху ембриони преди имплантация, за да се увеличи степента на успех по отношение на желаната бременност.

Като цяло системните проблеми възникват поради преувеличени очаквания за точността на резултатите от скрининга. Това се отнася както за положителния, така и за отрицателния резултат. Положителен резултат, т.е. най-малко една хромозомна аберация, е свързан с известна несигурност. Може да се случи, че положителният резултат погрешно изключва съответната яйцеклетка от трансплантация, въпреки че в действителност няма хромозомен дефект. Този тип неправилни диагнози се дължат по-малко на самата процедура, отколкото на факта, че ембрионите в стадия на бластулата могат да имат няколко клетки с хромозомни аберации.

От друга страна, бъдещите родители на дете с IVF не трябва да са сигурни, че ако тестът за анеуплоидия е отрицателен, всъщност няма хромозомна аберация. Друга опасност възниква, когато необходимия брой клетки се отстрани от ембриона. Случва се клетките, взети чрез биопсия, да умрат и вече да не могат да бъдат изследвани. Тъй като биопсията вече не може да бъде повторена на един и същ ембрион, тя вече не е достъпна за трансплантация, тъй като няма резултат от теста. Обсъжда се също до каква степен биопсията влияе върху плодовитостта на ембриона, така че да се повлияе общата успеваемост на бременността.